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转染

转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。  细胞化学转染
  常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。   转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。

        随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。

Transfection Products Transfection Reagents Transfection Methods

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质粒 DNA 转染
siRNA Transfection
invivo siRNA transfection

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Designed for effective and efficient nucleic
acid delivery into both traditional and
difficult-to-transfect cell lines and for
transient transfection in suspension cultures.

Lipofectamine™ LTX Transfection Reagent
Lipofectamine™ RNAiMAX 转染试剂
Lipofectamine™ 2000 转染试剂
Lipofectamine™ 转染试剂
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      脂质体(liposomes)的概念最 ...
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          &nb ...
In Vivo Transfection
高效且易于使用的体内RNAi输送试剂,可用于实现动物表型改变。 ...
Cotransfection
两种不同的载体或siRNA与质粒共同导入细胞的现象。 ...
Transient Transfection
外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主 细胞中可存在 ...
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      稳定转染,就是转染的质粒DNA ...
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通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中。有特定的宿主细胞 ...
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显微注射法
用显微操作直接将DNA直接注射到细胞核,具有稳定转染和瞬时转染 ...
阳离子聚合物
带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电复合物后与细 ...
真核筛选用抗生素
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