电穿孔法

          原理；电穿孔法的基本原理是细胞置于一个瞬时的高电场的环境中，此高电场的环境使得细胞膜的表面出现很多的小孔，这种条件下细胞膜对环境中的分子的渗透性大大增加，这样就可以将外源分子进入细胞。 运用这一技术，许多物质，包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法，电穿孔已被广泛用于各种细胞类型，包括细菌、酵母、植物和动物细胞；而且，它还能作为注射方法（称为电注射），把各种外源物质引入活细胞。

优点；操作方便，低毒性，高的转染效率，使用于广泛的细胞。

应用；导入标记基因，起到标记，指示作用；导入具体的功能基因进行研究；导入药物、蛋白、抗体等其他分子对细胞的结构和功能进行研究。

工作过程；

• 在电击的过程中，细胞膜上出现穿孔，质粒在电泳力的作用下与细胞膜接触，并细胞膜上电穿孔的区域形成一种可以移动的复合物。

• 再次电击后，质粒脱离复合物并扩散至细胞质内开始顺转；同时小部分质粒进入核内与染色体整合，开始稳染。

• 当外界的电场撤销后，细胞膜表面的小孔重新关闭，阻碍了外界分子的再次进入。

工程流程示意图；