细胞裂解缓液
细胞裂解液的主要目的有以下几种:(1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;(2)溶解蛋白;(3)蛋白变性使其稳定;(4)抑制蛋白酶活性。
细胞裂解液是指裂解细胞,使细胞释放出裂解产物的试剂。一般是指非变性细胞裂解缓冲液,内含非离子型去垢剂、盐和蛋白磷酸酶抑制剂,非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。
常见的裂解液
名称 |
Western及IP细胞裂解液 |
RIPA裂解液(强) |
RIPA裂解液(中) |
RIPA裂解液(弱) |
NP-40裂解液 |
SDS裂解液 |
有效裂解成分 |
1% Triton X-100 |
1% Triton X-100, 1% deoxycholate, 0.1% SDS |
1% NP-40, 0.5% deoxycholate, 0.1% SDS |
1% NP-40, 0.25% deoxycholate |
1% NP-40 |
1% SDS |
裂解强度 |
温和 |
强 |
中 |
温和 |
温和 |
强 |
对膜蛋白的提取 |
一般 |
很好 |
较好 |
一般 |
一般 |
很好 |
对胞浆蛋白的提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
对核蛋白的提取 |
较好 |
很好 |
较好 |
较好 |
较好 |
很好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
细胞核转录因子提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
含蛋白酶抑制剂 |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
含磷酸酯酶抑制剂 |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
主要用途 |
WB, IP,co-IP |
WB, IP |
WB, IP |
WB, IP, co-IP |
WB, IP,co-IP |
WB, ChIP |
*WB,western blot,免疫印迹;IP,Immunoprecipitation,免疫沉淀;co-IP,co-Immunoprecipitation,免疫共沉淀;ChIP,Chromatin Immunoprecipitation,染色质免疫沉淀。
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