电穿孔缓冲液
电穿孔法是将核酸、蛋白及其它分子导入多种细胞的高效技术。通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。也叫电转染。电穿孔buffer是电穿孔实验中用到的缓冲液。
缓冲液模仿了自然细胞环境,在确保高效转化核酸分子的同时也降低了细胞的死亡率。可以将siRNA、质粒DNA,其他分子转染不同的哺乳动物细胞,适用于指数衰减波和方波实验系统。
一般采用低盐缓冲液,等渗或高渗缓冲液会导致电休克,杀死大部分细胞,致使转染效率低。此外,DNA溶液中不应含有不能分解成离子的组分,如甘露糖醇、蔗糖等。这些大分子存在时会降低基因的转移效率。
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